至高效液相色谱图常见故障及解决方法

技术资料发布时间:2021-09-21

高效液相色谱图常见故障及解决方法

随着色谱技术的发展,色谱法不但可以用于分离有色物资,而且广泛地应用于分离无色物资,特别是有机化合物。液相色通过“政策性引导+市场化环境”谱中的许多问题都能在谱图上反应出来,其中有1些问题可以通过改变装备参数得到解决;而其他的问题必须通过修改操作程序来解决。对色谱柱和活动相的正确选择是得到好的色谱图的关键。

1、拖尾峰

1. 筛板阻塞,柱子两头的过滤筛板如果梗塞,样品就会在筛板部份受阻而构成时间延迟,使得样品在柱后流出时峰型构成拖尾。需要通过反冲色谱柱,或更换筛板。

2. 色谱柱塌陷,是指色谱柱由于其它缘由引发了柱效力丧失,不能对物资构成保存,使得物资不在固定相上保存而随活动相流出,但是又还有1点柱效,因此构成拖尾。需要重新填充色谱柱或更换色谱柱。

3. 有污染,即样品不在同1起跑线起跑,从后面开始跑得到达终点稍晚,表现出拖尾。更换色谱柱或采取有机溶剂梯度洗脱1h以上,以冲洗柱子。

4. 活动相PH值选择毛病,如某PH下有的样品存在份子型和离子型的动态平衡,离子型的陆续向份子型转化就会表现出拖尾。调理PH值可抑制份子解离,改良拖尾,对碱性化合物,相对较低的PH值更有益于得到对称峰。

2、前由1.5KW的同步电动机驱动沿峰

1. 样品过载,被保存的样品在正常出峰时间前陆续出来,构成前沿峰。下降样品含量。

2. 样品溶剂选择不恰当,当样品溶剂的洗脱能力大大强于活动相时会出现前沿峰,例如,在反相色谱中用已腈做样品溶剂,而活动相的洗脱力较弱时会出现前沿峰。选择活动相或接近活动相的比例作为样品溶剂。

3. 色谱柱破坏,色谱柱柱效损失,不能对物资构成保存。更换色谱柱。

4. 在大峰前有小峰出现,假象前沿峰,即大峰前包埋了没有分开的小峰。调剂活动相洗脱梯度。

3、基线漂移

1. 柱温波动,即便是很小的温度变化都会引发基线的波动,通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器。使用柱温箱,控制好柱子和活动相的温度,在检测器之前使用热交换器。

2. 活动相不均匀,活动相条件变化引发的基线漂移大于温度致使的漂移。使用HPLC级的溶剂,活动相在使用前进行脱气处理。

3. 流通池被污染或有气体。用甲醇或其他强极性溶剂冲洗流通两个实验工区从规范技术条件入手池。如有需要,可以用1N的硝酸。

4. 活动相配比不当或流速变化。更改配比或流速,为避免这个问题可定期检查活动相组成及流速。

5. 样品中有强保存的物资,以馒头峰样被洗脱出,从而表现出1个逐渐升高的基线。使用保护柱,如有必要,在进样之间或在分析进程中,定期用强溶剂冲洗柱子。

4、出现宽峰

1. 色谱柱污染或失效,造成塔板数下降。更换一样类型的色谱柱,如果新柱子可以提供对称的色谱峰,则用强溶剂冲洗旧柱子。

2. 柱子与检测器之间的管路太长或管路内径太大。更换内径较小的短管路。

3. 检测器对反应时间或池体积响应过大。减少响应时间或使用更小的流通池。

5、基线噪音

1. 在活动相、检测器或泵中有空气。活动相脱气,冲洗系统以除去检测器或泵中的空气。

2. 漏液。检查管路接头是不是松动,泵是不是漏液,是不是有盐析出和不正常的噪音。如有必要,更换泵密封。

3. 活动相混合不完全。用手摇动使混合均匀或使用低粘度的溶剂。

4. 温度影响。使用柱温箱,减少温度差异或加上热交换器。

5. 在同1条线上有其他电子装备。断开LC、检测器和记录仪,检查干扰是不是来自于外部,加以更正。 采取精密级稳压电源。

6、分离度不够

1.活动相梯度洗脱设置不公道。优化梯度洗脱程序。

2.活动相污染或变质。重新配置活动相。

3. 保护柱或分析柱阻塞。去掉保护柱进行分析,如果必要则更换保护柱;如果分析柱阻塞,可进行反冲;如果问题依然存在色谱柱可能被强保存的污染物破坏,建议使用恰当的再生程序;如果问题依然存在,进口可能阻塞了,更换入口处的筛板或更换色谱柱。

编辑点评

就近期色谱进展来看,我国色谱行业正处于逐步发展态势可见我国色谱行业正在突起,其前景10分可观,具有广阔的发展空间。未来,相信随着国产科研水平的不断提高,我国还将在色谱仪等相干仪器研发方面获得了重大突破,国产仪器势必迎来更好的发展态势。